鸡新城疫病毒抗膀胱癌作用的体内、体外实验分析

摘要：目的是研究和分析鸡新城疫病毒（NDV）抗膀胱癌作用的体内、体外实验。 方法是采用小鼠膀胱肿瘤模型方法进行研究。 结果是体内实验表明：对于膀胱癌细胞，BCG、MMC、NDV均具有一定杀伤作用，而 NDV 注射至瘤对侧以及瘤内能抑制其生长，且注射至瘤内的效果显著好于瘤对侧。 体外实验表明：对于膀胱癌细胞，BCG、MMC、NDV 均具有显著杀伤作用。 结论：鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞的体内、 体外均具有良好的杀伤作用。
关键词：鸡新城疫病毒；抗膀胱癌作用；体内、体外实验

近几年，由于生物治疗技术的逐渐兴起和发展，鸡新城疫病毒（NDV）逐渐获得人们的重视[1]。 已有研究报道显示，该病毒对恶性肿瘤，如恶性黑色素瘤、消化道肿瘤等，均具有治疗效果，且不会导致人体出现较大的不良反应， 所以是抗肿瘤生物制剂中比较有前途的一种。 但目前在膀胱癌治疗方面，对于该病毒的应用研究还相对较少[2]。 因此本文对鸡新城疫病毒抗膀胱癌作用的体内、体外实验进行了研究和分析，现具体报道如下：
1 一般资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 动物和细胞模型。 BST739（小鼠膀胱肿瘤模型）小鼠，体重 18～20 克，雌性，购自中国医学科学院肿瘤医院实验动物中心。 由北京医科大学泌尿外科研究所提供人膀胱癌 EL 细胞株。BST739 购自南京铁道医学院泌尿外科。
1.1.2 药物。 鸡新城疫病毒为冻干病毒疫苗，即 Losota，购自中国农业科学院兽药监察所。 临用前 BCG、MMC 配置浓度为 1毫克/毫升。
1.2 方法
1.2.1 体内实验
将 BST739 瘤体均分为 0.1 厘米直径的小块，与小鼠胸腹皮下进行接种，2 天后将 20 只带瘤小鼠随机分为 4 组，分别在其瘤体内注射 MMC（1 毫克/毫升 ）、BCG（1 毫克/毫升 ）、NDV（100 毫克/毫升）、生理盐水各 0.1 毫升，第 4 组则注射 NDV 至瘤体对侧皮下；另设 1 组注射至腹壁皮下。 3 天后同时与其他小鼠进行肿瘤接种。 隔日对接种瘤体的短径、长径进行测量，并计算其体积。
1.2.2 体外试验
在 96 孔培养板中加入 EJ 细胞， 细胞数量为 2×103/孔，含有 0.1 毫升培养液。 采用培养液将 NDV 配制成 1，10，100 毫克/毫升。 将 96 孔培养板中的细胞分为 4 组，当细胞贴壁 24 小时后将上清液吸出，并将上述 3 个浓度的病毒分别加入，各 0.1 毫升。而对照组加入培养液。 将 EJ 细胞采用同种方法加入 96 孔板。 采用培养液将 MMC、BCG 配置成 1 毫克/毫升， 将 NDV 配置成 10毫克/毫升。 待细胞贴壁 24 小时后将上清液吸出。 分别将 0.1 毫升的 MMC、BCG、NDV 加入各组。 将 0.1 毫升培养液加入对照组。5 天后采用电镜观察。
1.3 统计学分析
采用 POMS 软件处理数据结果。
2 结果
2.1 体内实验
对于膀胱癌细胞 ，BCG、MMC、NDV 均具有一定杀伤作用 ，而 NDV 注射至瘤对侧以及瘤内能抑制其生长，且注射至瘤内的效果显著好于瘤对侧。
2.2 体外实验
对于膀胱癌细胞，BCG、MMC、NDV 均具有显著杀伤作用。
3 讨论
自发现鸡新城疫病毒具有抗瘤作用至今， 总结其作用机制如下：（1） 病毒蛋白可与完整细胞或者肿瘤细胞膜碎片有机结合，并将肿瘤抗原的免疫原性有效提高，从而促使宿主的体液以及细胞具有更强的免疫抗肿瘤能力。 （2）病毒可与肿瘤细胞产生直接或者特异性细胞病毒作用。 （3）能够将宿主免疫系统中的各种细胞激活， 从而促使其产生 IL-6、IL-1、TNF-α 的能力增强[3]。而该病毒的免疫抗瘤作用， 即检测各种免疫因子以及监测全身免疫系统的作用还需进行深入的研究[4]。
本文的研究中 ， 体内实验表明 ： 对于膀胱癌细胞 ，BCG、MMC、NDV 均具有一定杀伤作用， 而 NDV 注射至瘤对侧以及瘤内能抑制其生长，且注射至瘤内的效果显著好于瘤对侧。 体外实验表明： 对于膀胱癌细胞，BCG、MMC、NDV 均具有显著杀伤作用。 因此可以看出，NDV 对肿瘤体内具有主要的杀伤作用，而皮下注射引发的免疫抗瘤做用则是次要的。
综上所述，鸡新城疫病毒对膀胱癌细胞的体内、体外均具有良好的杀伤作用。